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技術(shù)文章

聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)的原理

那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡單介紹一下關于聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)的原理:
SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝膠電泳)是一種用于根據(jù)蛋白質(zhì)混合物的大小分離其成分的分析方法。
該技術(shù)基于這樣的原理,即帶電分子將在電場中朝具有相反符號的電極遷移。常規(guī)電泳技術(shù)不能用于確定生物分子的分子量,因為物質(zhì)在凝膠中的遷移率取決于電荷和大小。
為了克服這個問題,需要對生物樣品進行處理,以使其獲得均勻的電荷,然后電泳遷移率主要取決于尺寸。對于這種具有不同形狀和大小的蛋白質(zhì)分子,需要進行變性(在SDS的幫助下完成),以使蛋白質(zhì)失去二級,三級或四級結(jié)構(gòu)。被SDS覆蓋的蛋白質(zhì)帶負電,并在上樣時凝膠并置于電場中,它將朝著陽極(帶正電的電極)遷移,并通過基于分子篩分作用的大小分開。通過染色(蛋白質(zhì)特異性)技術(shù)進行可視化后,可以通過將蛋白質(zhì)的遷移距離與已知分子量階梯(標記)的遷移距離進行比較來計算蛋白質(zhì)的大小。
 
以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結(jié)關于聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)的原理。
 
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