核酸鑒定包括:濃度/純度鑒定+完整性鑒定" />

国产精品一区成人精品果冻传媒|精品久久久国产|真人裸体做爰黄大片视频|午夜一区二区三区四区

超微量分光光度計、蛋白純化系統(tǒng)、核酸蛋白檢測儀、紫外分析儀、凝膠成像分析系統(tǒng)、化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng)、切膠儀、自動部分收集器、梯度混合儀、恒流泵、蠕動泵、光化學(xué)反應(yīng)儀、餾分收集器

技術(shù)文章

核酸鑒定方法之濃度

      核酸純化在分子生物學(xué)實驗室已經(jīng)廣泛應(yīng)用。怎樣獲得質(zhì)量、純度的DNA或RNA樣品對下游實驗的順利進(jìn)行至關(guān)重要,因此,對純化后的核酸進(jìn)行鑒定也是必不可少的步驟。本文簡單的回顧學(xué)習(xí)下核酸鑒定的方法。
核酸鑒定包括:濃度/純度鑒定+完整性鑒定
 
1.濃度/純度鑒定
 
(1)紫外分光光度計:
原理:由于核酸中的堿基都具有共軛雙鍵,所以具有紫外光吸收性質(zhì)。核酸在紫外光譜區(qū)有條典型的吸收曲線,其吸收峰在260nm處,吸收低谷在230nm處。蛋白質(zhì)在紫外區(qū)的吸收峰在280nm處,所以核酸的紫外吸收光譜數(shù)據(jù)是鑒定核酸的重要依據(jù)之。

由于核苷酸大吸收波長為260nm,根據(jù)朗伯-比爾定律可計算出在波長260nm的紫外線下,1個OD值的光密度大約相當(dāng)于50µg/ml的雙鏈DNA, 40µg/ml的單鏈RNA。紫外分光光度法只適用于測定濃度大于0.25µg/ml的核酸溶液。
 
計算公式:
dsDNA(µg/µl)=OD260x50x稀釋倍數(shù)/1000
RNA(µg/µl)=OD260x40x稀釋倍數(shù)/1000
 
純凈的DNA OD260/OD280=1.8,制備的樣品DNA比值在1.7-1.9,若洗脫時不使用洗脫緩沖液而使用去離子水,比值會偏低,因為PH值和離子存在會影響光的吸收值。

當(dāng)OD260/OD280< 1.7,表明蛋白質(zhì)含量較,可用利用酚、氯仿、異戊醇抽提,再用乙醇沉淀去除。
當(dāng)OD260/OD280> 2.0,表明RNA含量較??捎肦NaseA消化后再進(jìn)行純化。
OD260/OD230的值,般不小于2.0,若小于2.0,表明有碳水化合物、鹽類或有機(jī)試劑污染。
在線客服

微信公眾號

国产精品一区成人精品果冻传媒|精品久久久国产|真人裸体做爰黄大片视频|午夜一区二区三区四区

国产精品人人做人人爽| 亚洲日产精品一二三四区新增区域 | 天天日天天干天天添| 亚洲一区二区黄色| 日韩av一区不卡| 久久久国产精品x99av| 中文字幕一区二区三区乱码图片 | 婷婷激情五月天基地| 亚洲熟伦一区二区毛片| 人妻不卡中文字幕| 久久是精品| 少妇高潮一区二区三区在线| 久久久久久人妻一区精品| chinese高潮videos叫床| 国产一级av在线| 少妇被内射视频| 天天日,夜夜爽| 人妻va精品va欧美va图片| 少妇人妻综合久久中文字幕 | 内射视频免费看| yy6080影院午夜理论片在线观看| freexxx69性欧美hd| 国语露脸对白| av成人免费在线| 中文字幕欧美人妻精品一区| 丝袜av一区| 成人精品网站在线观看| 午夜视频在线看| 国产乱子伦农村叉叉叉| 老熟女的性生活| 亚洲一区播放| 欧美成人一区二区| 性欧美videossex精品| 欧美日韩国产一级片| 中文字幕女人妻热女人妻| 色噜噜久久| 91久久精品一区二区二区| 免费观看国产精品视频| 国产精品久久久久久久久久久久午夜| 精品一区二区三区丰满熟女| 欧美成人三级一区二区|